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染料浓度的测量

在显微镜中,图像处理的目的不仅仅是生成美观的图像,还包括定量或至少定性结果的推导和提取。颜色反卷积算法就可以完成这项任务。它将染色组织样本的彩色图像转换为染料吸收的浓度分布。

下面图像中的组织已被苏木素 C19 和 DAB(3,3'-二氨基联苯胺)染色。

有关文献提供了两种染色剂的典型 RGB 颜色。理论上,染料的颜色是通过将它们的色谱与记录相机中 CCD 的红色、绿色和蓝色通道的灵敏度光谱相乘得到的。如果将这些乘法称为颜色卷积,则逆操作即可被称为颜色反卷积,实际上就是对染色进行颜色分层。

获取从染料到 RGB 颜色通道的转换矩阵。

计算从颜色到染料浓度的线性逆转换。

实际的颜色分层是对颜色强度的对数进行操作,因为颜色吸收与染料浓度成指数比例关系。这里给出了简单的实现颜色反卷积的方法。

执行颜色反卷积,将颜色分为苏木素和 DAB 染色浓度。

将每个分量与相应的染色剂的颜色相乘。

用假色表示染色浓度。

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